![(BR) 00.49.785 Preparo de bibliotecas NGS](/fileadmin/_processed_/8/b/csm_49_785_0200_2925_NGS_Library_Preparation_0123_4e8da44353.png)
Preparo de bibliotecas NGS
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A gama de PCR Multiply® abrange produtos e acessórios certificados para a transferência homogênea de temperatura, tempos de ciclo mais curtos e resultados reprodutíveis em PCR e qPCR.
IsoFreeze® MCT Rack, material: PP, de várias cores, dimensão da grade: 6 x 4, adequado para recipientes de reação Ø 10,8 mm (1,5 ml & 2 ml), 1 unid./caixa de papelão
IsoFreeze® PCR Rack, material: PP, de várias cores, dimensão da grade: 12 x 8, adequado para recipientes PCR de 0,1 ml e 0,2 ml, cadeias de PCR e placas PCR, A cor muda de lilás para rosa a 7 °C, 2 unid./caixa de papelão
Bandeja de travalho PCR, material: PC, transparente, dimensão da grade: 12 x 8, adequado para recipientes PCR de 0,1 ml e 0,2 ml, 5 unid./pacote
Estação básica, material: PC, transparente, (CxLxA): 128 x 85,5 x 30,4 mm, adequado para bandeja de travalho 95.987.002 & recipientes PCR de 0,2 ml, 5 unid./caixa de papelão
Estação básica, material: PC, vermelha, (CxLxA): 128 x 85,5 x 30,4 mm, adequado para bandeja de travalho 95.987.002 & recipientes PCR de 0,2 ml, 5 unid./caixa de papelão
As placas e os recipientes PCR Low-Profile têm uma altura reduzida, minimizando, assim, o volume morto dos poços individuais em relação aos produtos "High-Profile". Desta forma, é possível reduzir substancialmente os volumes dos reagentes usados e, consequentemente, obter uma redução significativa de custos.
Quando o material de origem disponível é muito escasso e, consequentemente, a concentração do respectivo cDNA é baixa.
Graças às excelentes propriedades de reflexão dos poços das placas PCR Multiply® brancas, se evita um "crosstalk" entre os poços e o nível de fluorescência da reação qPCR aumenta para o fator 10. Desta forma, mesmo com quantidades muito baixas de material de origem, é possível gerar valores de Ct confiáveis nos ciclos comuns de qPCR.
Quando se deseja obter a menor variabilidade possível.
As placas PCR Multiply® brancas, por suas excelentes propriedades de reflexão permitem um nível de fluorescência mais uniforme e estável da reação qPCR. Isso leva a uma reprodutibilidade claramente melhor dos resultados medidos e a uma maior precisão. Sugestão: para melhorar ainda mais a variabilidade, recomendamos o processamento, pelo menos, do DNA modelo, mas melhor ainda de todos os reagentes usados, com nossas pontas de pipeta Low Retention.
Quando é preciso poupar em reagentes.
Graças às excelentes propriedades de reflexão das placas PCR Multiply® brancas, o nível de fluorescência da reação qPCR aumenta para o fator 10. Isso permite reduzir consideravelmente os volumes de reagentes usados e, consequentemente, obter uma redução de custos significativa.
A princípio, existe a possibilidade de autoclavar nossos recipientes e placas PCR, por serem de polipropileno, sem que isso influencie suas propriedades materiais. Contudo, todos os recipientes e placas PCR Multiply® da Sarstedt são fabricados em condições de sala limpa, isentos de DNasen/RNasen, de DNA e de inibidores de PCR ("PCR Performance Tested"). Desta forma, os parâmetros mais importantes para um resultado PCR confiável ficam assegurados desde o início e nossos recipientes e placas PCR podem ser imediatamente usados para a reação PCR. Por isso desaconselhamos a autoclavagem dos recipientes e das placas PCR com certificação "PCR Performance Tested", dado que, com este passo e contrariando sua intenção, existe o perigo de contaminar os materiais com ácidos nucleicos.
A princípio, e por serem fabricados em polipropileno, nossos recipientes e placas PCR Multiply® podem ser congelados. Contudo, as condições de congelamento devem ser escolhidas de forma a que o conteúdo seja congelado uniformemente ou de baixo para cima. Se, devido a condições de congelamento desfavoráveis, o recipiente começar a congelar por cima, poderão surgir fissuras por expansão na parte de baixo. Como exemplo, os suportes de isopor, dependendo do diâmetro da abertura, têm um forte efeito isolante, que dificulta o congelamento das amostras por igual. Devido aos inúmeros fatores que podem ter influência (a carga dos recipientes pode ser muito diferente dependendo do líquido a ser congelado e das condições de rotina), recomendamos que faça um teste de congelamento de acordo com suas condições de rotina.
Disponibilizamos para o qPCR cadeias de tampas especiais (65.1998.400) e uma seleção de filmes transparentes (95.1994, 95.1999). Os artigos com tampas foscas das cadeias PCR têm a vantagem de facilitar a escrita e são indicados para aplicações PCR padronizadas.